dtt溶解和保存条件？

DTT是什么试剂？

用20ml 0.01mol/L乙酸钠溶液（pH5.2）溶解3.09g DTT，过滤去菌后分装成1ml小份贮存于-20℃。

【注意】DTT或含有DTT不能对溶液进行高压处理。

保存条件:

-20℃保存。1M DTT溶液可以在-20℃保存2年以上。

DTT其中一个用途是作为一基化DNA还原剂和去保护剂。DNA末端硫原子倾向于在溶液中形成二聚体，尤其是在有氧的情况下。这种二聚化大大降低了一些偶联反应实验(如DNA生物传感器中的固定）效率DNA溶液中加入DTT，反应一段时间后，可以减少DNA的二聚化。

dtt溶解和保存条件？

DTT( 二硫苏糖醇)是实验室常用的还原试剂，常用于蛋白质保存和蛋白质二硫键还原。DTT进入的特点是容易氧化，稳定性差，一般DTT常保存在-20度可长达数年。

DTT它是一种非常强的还原剂，其还原性在很大程度上是由于其氧化状态六元环（包括二硫键）的结构稳定性。它的氧化还原电势在于pH为7时为-0.33伏。

DTT特点与DDT的保存

DTT是一种常用的还原剂，具有抗氧化作用，进口分装。DTT与巯基乙醇相比，效果相似，但是DTT刺激性气味要小得多，毒性要比巯基乙醇低得多。DTT在浓度比较低7倍于巯基乙醇的情况下，两者的效果相似。DTT价格略高。DTT一般保存条件：-20℃保存。1M DTT溶液可以在-20℃保存2年以上。

因为容易被空气氧化，DTT稳定性差，但在惰性气体中冷冻或处理可以延长其使用寿命。由于质子化的硫亲核性较低，pH值的降低，DTT有效还原也随之降低Tris(2-carboxyethyl)phosphine HCl(TCEP盐酸盐)可以作为低pH值条件下DTT替代品，替代品DTT更为稳定。

应用：

DTT其中一个用途是作为一基化DNA还原剂和去保护剂。DNA末端硫原子倾向于在溶液中形成二聚体，尤其是在有氧的情况下。这种二聚化大大降低了一些偶联反应实验(如DNA生物传感器中的固定）效率DNA溶液中加入DTT，反应一段时间后，可以减少DNA的二聚化。

DTT它也常用于还原蛋白质中的二硫键，可以用来防止蛋白质中的半胱氨酸之间形成的蛋白质分子 分子间内或二硫键。但DTT蛋白质结构中包埋的二硫键（溶剂无法触及）通常无法恢复。这种二硫键的恢复通常需要首先改变蛋白质（高温加热或添加变性剂，如6M 盐酸胍、8M 尿素或1\\% SDS)。反之，根据DTT在存在的情况下，二硫键的还原速度不同，可以判断其包埋程度的深度。

DTT在蛋白纯化 以及在保存中的作用

我们知道Cys存在于许多蛋白中-SH它通常作为一个活跃的中心起作用，或者，两个-SH二硫键连接，是维持蛋白质先进结构的重要桥梁。-SH具有很强的还原性，溶液被溶液中的溶解氧或其它氧化物氧化，使蛋白质失去活性。因此，在蛋白纯化中 保存时，在溶液中加入一定量DTT，以免蛋白-SH被氧化而失活。但是这里有一个矛盾，DTT加多少量，使-SH保持还原状态，使二硫键不还原？除上述功能外，DTT还有哪些方面可以发挥作用？

我也听过一位专家说，以摩尔数为基础，保护5-10倍的数量-SH。如果报告了蛋白质buffer中含有15\\大约%的甘油对蛋白质有很好的稳定作用。补充一点:如果:dtt蛋白摩尔的比例增加到1:100，DTT二硫键可以被破坏，此时相应的浓度一般为10mM左右，这通常用于还原肽图。

但是有些分子 由于空间位阻的作用，内部二硫键的还原剂量增加到很大程度，无法破坏。此时，可能需要与尿素等变性剂结合，以完全中断二硫键（如内含体变性）

DTT只有在离子状态下才有效pH7-9.5时效果强，pH降到3以下几乎没有电离，所以可以通过减少来减少pH下来到3DTT现在才知道DTT作用还受到pH的影响。说到尿素变性，如果蛋白质中存在分子 即使有高浓度的尿素或盐酸胍，浓度的尿素或盐酸胍，也没有高浓度的二硫键DTT还原剂不能完全改变蛋白质(打破二硫键)